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如今，幾乎每位研究人員都或多或少地知道生成誘導(dǎo)多能干細(xì)胞（iPSC）的配方。拿出體細(xì)胞，加入四種轉(zhuǎn)錄因子，等待幾個(gè)星期，搞定！不過(guò)，這其中到底發(fā)生了什么，卻是一個(gè)謎，人們想了解卻還未了解。顯然，這涉及到表觀遺傳學(xué)：從成纖維細(xì)胞轉(zhuǎn)變成iPSC，意味著那些過(guò)去關(guān)閉的基因必須再次啟動(dòng)。其他基因，比如細(xì)胞分化的標(biāo)志，則必須調(diào)低。西奈山醫(yī)院Lunenfeld-Tanenbaum研究所的資深科學(xué)家AndrasNagy談道：“每個(gè)細(xì)胞的基因組都幾乎是相同的。表觀基因組哪些基因表達(dá)，哪些蛋白...

G-protein-coupledreceptors(GPCRs)areactivatedbyawidevarietyofexternalstimuli.UponreceptoractivationtheG-proteinexchangesgdpforGTP,causingthedissociationoftheGTP-boundGalphaａndtheGbetagammasubunits,triggeringdiversesignalingcascades.Receptor...

雙PAG免疫金銀染色原理(一)染色流程：(1)石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min.(2)0.1%胰蛋白酶37℃消化20min,或抗原修復(fù)20min(98℃)，自然冷卻至室溫。(3)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×3min.(4)1%EA(卵蛋白)15min,不洗。(5)適當(dāng)稀釋的特異抗體室溫4h或4℃孵育20h,或37C孵育30min.(6)0.05mol/L(pH7.4)TBS洗3×5min.(7)0.02mol/L(pH...

抗體藥物作為生物技術(shù)產(chǎn)業(yè)的關(guān)鍵驅(qū)動(dòng)力，能安全有效地對(duì)癌癥、自身免疫病和感染性疾病等進(jìn)行靶向治療，該藥物在2012年創(chuàng)下645.7億美元的銷(xiāo)售額，占生物制藥51.8%的份額。目前抗體藥物的市場(chǎng)需求量仍在攀升，預(yù)計(jì)到2015年，抗體藥物銷(xiāo)售額有望達(dá)980億美元左右。業(yè)內(nèi)人士認(rèn)為，隨著疾病譜變化，抗體藥物的黃金時(shí)代已經(jīng)來(lái)到。單抗藥物的作用靶點(diǎn)很重要的一部分是行使細(xì)胞功能*的跨膜蛋白，包括多通道膜蛋白MMP(如g蛋白偶聯(lián)受體)和離子通道，這些蛋白也是診斷檢測(cè)的重要分析靶點(diǎn)。目前跨膜蛋...

一、目的通過(guò)氨基酸的分離，學(xué)習(xí)紙層析法的基本原理及操作方法。二、原理紙層析法是用濾紙作為惰性支持物的分配層析法。層析溶劑由有機(jī)溶劑和水組成。物質(zhì)被分離后在紙層析圖譜上的位置是用Rf值(比移)來(lái)表示的：R=原點(diǎn)到層析點(diǎn)中心的距離原點(diǎn)到溶劑前沿的距離在一定的條件下某種物質(zhì)的Rf值是常數(shù)。Rf值的大小與物質(zhì)的結(jié)構(gòu)、性質(zhì)、溶劑系統(tǒng)、層析濾紙的質(zhì)量和層析溫度等因素有關(guān)。本實(shí)驗(yàn)利用紙層析法分離氨基酸。三、器材1、層析缸①2、毛細(xì)管3、噴霧器4、培養(yǎng)皿5、層析濾紙(新華一號(hào))四、試劑1、擴(kuò)...

T細(xì)胞受體(Tcellreceptor，TCR)是T細(xì)胞表面特異性識(shí)別抗原和介導(dǎo)免疫應(yīng)答的分子，是人類(lèi)基因組中多態(tài)性zui高的區(qū)域之一，決定著人的免疫系統(tǒng)如何適應(yīng)環(huán)境的變化。T細(xì)胞受體庫(kù)的多樣性(包括基因重組以及選擇性表達(dá))直接反映了機(jī)體免疫應(yīng)答的狀態(tài)。TCR可分為T(mén)CRα/β和TCRγ/δ兩種類(lèi)型,外周血T細(xì)胞主要為T(mén)CRα/β的T細(xì)胞,是介導(dǎo)機(jī)體特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)的主要細(xì)胞。如圖1所示：TCRβ基因由可變區(qū)(V)、多變區(qū)(D)、結(jié)合區(qū)(J)和恒定區(qū)(C)四部分基因片段組成...

實(shí)驗(yàn)室離心機(jī)離心管種類(lèi)有多種。1、按材質(zhì)可分：塑料離心管、玻璃離心管和不銹鋼離心管等。2、按速度可分：低速離心管和高速離心管。3、按容量可分：微量離心管、小容量離心管和大容量離心管。一般稱(chēng)容量大于100mL的離心管為離心瓶。4、按離心管口部形狀可分：縮口離心管和直口離心管。5、按離心管底部形狀可分：圓底離心管、尖底離心管和平底離心管。6、按離心管與蓋接合形式可分：摁蓋離心管和螺口離心管。7、按用途可分：制備型離心管和分析型離心管。elisa試劑盒,進(jìn)口elisa試劑盒,國(guó)產(chǎn)e...

增加PCR的特異性：1.primersdesign這是zui重要的一步。理想的，只同目的序列兩側(cè)的單一序列而非其它序列退火的primer要符合下面的一些條件1)足夠長(zhǎng),18-24bp,以保證特異性.當(dāng)然不是說(shuō)越長(zhǎng)越好,太長(zhǎng)的primer同樣會(huì)降低特異性,并且降低產(chǎn)量2)GC%40%~60%3)5'端和中間序列要多GC,以增加穩(wěn)定性4)避免3'端GCrich,zui后3個(gè)BASE不要有GC,或者zui后5個(gè)有3個(gè)不要是GC(有人說(shuō)：3'端是GC/CG/CC/GG。)5)避免3'...

細(xì)胞培養(yǎng)是實(shí)驗(yàn)室里zui常見(jiàn)和zui基本的實(shí)驗(yàn)了，但卻不是zui簡(jiǎn)單的。別小看細(xì)胞培養(yǎng)，這里可蘊(yùn)含著大學(xué)問(wèn)。有時(shí)候細(xì)胞狀態(tài)不好，轉(zhuǎn)染、藥篩這些實(shí)驗(yàn)根本就沒(méi)辦法做。影響細(xì)胞培養(yǎng)的因素很多，讓我們先從培養(yǎng)基和血清說(shuō)起。經(jīng)典的培養(yǎng)基有很多種，Invitrogen(GIBCO)、thermofisher(HyClone)、Sigma等公司都可以提供。其中DMEM、RPMI1640、MEM、DMEM/F12都是應(yīng)用zui廣泛的培養(yǎng)基。其他如M199、IMDM、L15培養(yǎng)基等也用于某些細(xì)...

生物信息學(xué)主要應(yīng)用到HMM隱馬可夫鏈的方法。數(shù)學(xué)中具有馬爾可夫性質(zhì)的離散時(shí)間隨機(jī)過(guò)程。該過(guò)程中，在給定當(dāng)前知識(shí)或信息的情況下，只有當(dāng)前的狀態(tài)用來(lái)預(yù)測(cè)將來(lái)，過(guò)去(即當(dāng)前以前的歷史狀態(tài))對(duì)于預(yù)測(cè)將來(lái)(即當(dāng)前以后的未來(lái)狀態(tài))是無(wú)關(guān)的。在馬爾可夫鏈的每一步，系統(tǒng)根據(jù)概率分布，可以從一個(gè)狀態(tài)變到另一個(gè)狀態(tài),也可以保持當(dāng)前狀態(tài)。狀態(tài)的改變叫做過(guò)渡，與不同的狀態(tài)改變相關(guān)的概率叫做過(guò)渡概率。隨機(jī)漫步就是馬爾可夫鏈的例子。隨機(jī)漫步中每一步的狀態(tài)是在圖形中的點(diǎn)，每一步可以移動(dòng)到任何一個(gè)相鄰的點(diǎn)，...