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更新時(shí)間:2018-01-25      瀏覽次數(shù):1216

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放射免疫分析(RIA)是以放射性核素作示蹤劑的標(biāo)記免疫分析方法,它具有高度靈敏性、特異性和性等特點(diǎn),特別適用于激素、多肽等含量微少物質(zhì)的超微量分析。自20世紀(jì)50年代末*以來,RIA被廣泛地應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)的各個(gè)領(lǐng)域。
經(jīng)典RIA是采用標(biāo)記抗原和非標(biāo)記抗原競爭性結(jié)合有*特異性抗體的反應(yīng)。
RIA具體測(cè)定方法包括以下三個(gè)主要步驟:

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(一)抗原抗體反應(yīng)
根據(jù)RIA原理,將未標(biāo)記抗原(標(biāo)準(zhǔn)品和待測(cè)樣品)、標(biāo)記抗原和特異性抗體加入反應(yīng)試管中,在一定條件(溫度、時(shí)間及介質(zhì)pH)下進(jìn)行競爭抑制反應(yīng)。

(二)分離結(jié)合與游離標(biāo)志物
RIA反應(yīng)平衡后,標(biāo)記抗原與試劑抗體形成免疫復(fù)合物(B)。由于其含量極少,不能自行沉淀,因此需加入適當(dāng)?shù)某恋韯┎拍軐⑵?沉淀,然后經(jīng)離心使其與游離的標(biāo)記抗原(F)分離。某些小分子抗原,也可采用吸附法分離B與F。
理想的分離方法應(yīng)分離*、迅速;分離試劑和過程不影響反應(yīng)平衡,而且效果不受反應(yīng)介質(zhì)因素的影響;操作應(yīng)簡單、重復(fù)性好以及經(jīng)濟(jì)。

(三)放射性測(cè)量及數(shù)據(jù)處理
分離B、F后,既可對(duì)標(biāo)記抗原抗體復(fù)合物(B)進(jìn)行放射性測(cè)量,也可根據(jù)RIA實(shí)驗(yàn)方法及目的,測(cè)定游離標(biāo)記抗原(F)。繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線(劑量-反應(yīng)曲線),樣品管以其測(cè)量或計(jì)算的反應(yīng)參數(shù),通過標(biāo)準(zhǔn)曲線即可查出相應(yīng)的待檢抗原濃度,目前已普遍采用計(jì)算機(jī)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理、自動(dòng)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線和打印樣品抗原濃度。

放射免疫測(cè)定法,因?yàn)椴僮鬏^復(fù)雜,需時(shí)間較長,需有一定的設(shè)備,又有一定的放射性污染,使其應(yīng)用受到一定限制。上海信帆生物科技有限公司專業(yè)提供放射免疫代測(cè)服務(wù),解決了沒有放射儀器和產(chǎn)生放射污染的問題,讓你的實(shí)驗(yàn)不再有限制。

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