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標題《心臟干細胞分離培養(yǎng)及其增殖與遷移的機制》

摘要：背景:體外環(huán)境下進行心臟干細胞培養(yǎng)的過程中,生長微環(huán)境可能會對細胞的的增殖等產(chǎn)生一定的影響。目的:在體外環(huán)境下培養(yǎng)大鼠心臟干細胞,探討心臟干細胞增殖、遷移的可能機制。方法:納入SD大鼠10只,獲得心肌組織塊進行原代和傳代培養(yǎng)。收集第3代心臟干細胞進行免疫熒光染色,進行干細胞鑒定,檢測干細胞生長因子受體（c-kit）和CD45、CD90的表達。收集培養(yǎng)后的組織塊,隨機分為2份,一份用多聚甲醛進行固定,常規(guī)石蠟包埋后切片,進行蘇木精-伊紅染色、Masson染色以及細胞凋亡檢測;另一份在培養(yǎng)基中添加Ed U標記增殖細胞,采用免疫熒光染色檢測c-kit陽性細胞以及基質(zhì)金屬蛋白酶2,9及轉(zhuǎn)化生長因子β1等表達。結(jié)果與結(jié)論:（1）細胞鑒定結(jié)果:心肌組織培養(yǎng)7-10 d后有明亮的圓形細胞長出,細胞貼壁后呈梭狀,生長、增殖能力旺盛。免疫熒光染色可觀察到大量細胞呈c-kit、CD45陽性表達,CD90陰性表達;（2）細胞凋亡情況:培養(yǎng)的組織塊切片后染色見大量新生細胞生長的同時伴隨心肌細胞的凋亡;（3）免疫熒光染色結(jié)果:經(jīng)EdU標記后陽性細胞分布于心肌間隙,基質(zhì)金屬蛋白酶2,9及轉(zhuǎn)化生長因子β1少量表達,... 更多

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