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更新時(shí)間:2025-10-10      瀏覽次數(shù):1566

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標(biāo)題《lncRNA LUCAT1對膀胱癌細(xì)胞增殖、凋亡的影響及其機(jī)制研究》

摘要:目的探討lncRNA LUCAT1對膀胱癌細(xì)胞的增殖和凋亡的影響以及潛在的作用機(jī)制。方法培養(yǎng)正常膀胱上皮細(xì)胞SV-HUC-1和膀胱癌細(xì)胞J82、5637、BIU-87,將膀胱癌細(xì)胞5637隨機(jī)分為control組、si-NC組,si-LUCAT1組、pcDNA-NC組、pcDNA-LUCAT1組、si-LUCAT1+anti-miR-NC組、si-LUCAT1+anti-miR-493-5p組。qRT-PCR法檢測miR-493-5p和LUCAT1表達(dá)水平;Western Blot檢測蛋白表達(dá);MTT法檢測細(xì)胞活性;流式細(xì)胞術(shù)檢測細(xì)胞凋亡;雙熒光素酶報(bào)告實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證LUCAT1和miR-493-5p的靶向關(guān)系。結(jié)果與膀胱上皮細(xì)胞SV-HUC-1相比,膀胱癌細(xì)胞J82、5637、BIU-87中LUCAT1的表達(dá)水平明顯升高,miR-493-5p表達(dá)水平明顯降低,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05);與si-NC組相比,si-LUCAT1組細(xì)胞活性降低,凋亡率升高,CyclinD1

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  細(xì)胞凋亡是細(xì)胞的基本特征之一,在機(jī)體的胚胎發(fā)育、組織修復(fù)、內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)定等方面都起到十分重要的作用。Annexin V 是一種分子量為35.8 KD 的Ca2+依賴性磷脂結(jié)合蛋白,能與細(xì)胞凋亡過程中翻轉(zhuǎn)到膜外的磷脂酰絲氨酸(Phosphatidylserine, PS)高親和力特異結(jié)合。FITC-Annexin V 結(jié)合到凋亡細(xì)胞后,在藍(lán)色光的激發(fā)下,發(fā)出綠色熒光,區(qū)分出凋亡細(xì)胞與正常細(xì)胞。碘化丙啶(Propidium iodide,PI)是一種核酸染料,它不能穿透完整細(xì)胞膜,但對凋亡晚期細(xì)胞和死細(xì)胞的破損細(xì)胞膜能夠穿透,并使細(xì)胞核紅染。將FITC-Annexin V 與PI 匹配使用,可以將凋亡早期的細(xì)胞和晚期的細(xì)胞區(qū)分開來。

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