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信帆生物:miRNA實驗代做,miRNA的純化技術(shù)分析

更新時間:2016-01-14      瀏覽次數(shù):1010

上海信帆生物代做miRNA實驗,PCR技術(shù)服務(wù),代測時間短,價格優(yōu),專業(yè)的實驗操作人員,的,保證您的每一份實驗數(shù)據(jù)均真實可靠,咨詢!

microRNA(miRNA)是天然存在、長約22個核苷酸的非編碼RNA,它們介導了轉(zhuǎn)錄后的基因調(diào)控。miRNA在許多生物過程中扮演了重要角色,包括分化和發(fā)育、細胞信號通路以及對感染的反應(yīng)。大量的證據(jù)表明,miRNA表達的失調(diào)是一些疾病過程(包括許多癌癥)的起因或指示劑。研究還發(fā)現(xiàn)血清和血漿中可以檢測到循環(huán)miRNA,且它們的表達因疾病而異,這一發(fā)現(xiàn)說明循環(huán)miRNA的表達特征可作為疾病診斷和預(yù)防的生物標志物,具有巨大潛力。

miRNA研究的成功依賴于高性能工具和技術(shù)的使用。QIAGEN是一個一站式供應(yīng)商,滿足您在miRNA純化、定量和功能鑒定上的所有需求。歡迎訪問QIAGEN的GeneGlobe® 網(wǎng)頁),訂購miRNA特異的產(chǎn)品,并發(fā)現(xiàn)大量寶貴的基因信息、通路信息和生物信息學工具。

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QIAGEN提供了以下方案:

一、miRNA純化
利用miRNeasy Kits和PAXgene® Kits純化高質(zhì)量總RNA,包括miRNA。

二、miRNA表達譜分析
利用miScript® miRNA PCR Arrays快速分析整個miRNA組(miRNome)或通路聚焦的miRNA分析板

三、miRNA生物發(fā)生和調(diào)控研究
利用miScript PCR System同時定量成熟的miRNA(聯(lián)合miScript Primer Assays)、前體miRNA(聯(lián)合miScript Precursor Assays)和mRNA目標(聯(lián)合QuantiTect® Primer Assays)。

四、miRNA功能分析
利用miScript miRNA Mimics、Inhibitors和Target Protectors確定miRNA的功能。

miRNA的純化

高質(zhì)量miRNA純化

高質(zhì)量的總RNA(包括miRNA)的純化,是成功的miRNA定量實驗的前提條件,因為質(zhì)量不佳的RNA會阻礙酶促反應(yīng),且小RNA的低效純化會導致不準確的結(jié)果。為miRNA純化而推出的miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 確保您的實驗有zui高質(zhì)量的RNA。miRNA產(chǎn)量優(yōu)于其他miRNA純化方法,如苯酚抽提和沉淀。如有必要,miRNA純化也可在QIAcube®或QIAsymphony® 儀器上自動開展

總RNA的純化或miRNA的富集

miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 可純化總RNA,包括~18 nt以上的RNA。另外,對于所有樣品類型,除包含嚴重降解RNA的樣品(如FFPE組織)和包含少量大RNA(如血清/血漿樣品)的樣品外,miRNeasy Kits可分別純化富含miRNA的組分(< ~200 nt)和總RNA組分(> ~200 nt)。利用miRNeasy 和PAXgene miRNA Kits 純化得到的RNA適合各種下游應(yīng)用,如northern blot分析、芯片分析及實時定量RT-PCR。在某些應(yīng)用(如一些芯片系統(tǒng))中,小RNA的富集可降低背景,但利用miScript miRNA PCR Arrays 和miScript Primer Assays 的分析則不需要。

從組織和細胞中純化

miRNeasy Mini、Micro和96 Kits 可從組織和細胞中純化RNA,即使所用的起始材料量很少。RNA可從各種組織和細胞中純化,包括難以裂解的組織。包括miRNA在內(nèi)的總RNA純化實現(xiàn)了miRNA與那些目標mRNA、參照看家基因或其它目的mRNA表達水平的直接比較。

從血清或血漿中純化循環(huán)miRNA

循環(huán)miRNA可作為檢測不同癌癥及其他疾?。ㄈ缣悄虿。┑臐撛谏飿酥疚?。利用從血清或血漿中純化得到的RNA,研究已發(fā)現(xiàn)一些miRNA在一些癌癥中的*表達。miRNeasy Serum/ Plasma Kit 能夠從少量的血漿或血清中純化總RNA。miRNeasy Serum/Plasma Spike-In Control提供了一個合成的加標對照,適用于研究血清或血漿樣品時的標準化。純化得到的RNA之后可用于miScript PCR System,以發(fā)現(xiàn)生物標志物。

從FFPE切片中獲得高純度RNA

交聯(lián)和片段化讓FFPE切片的核酸純化挑戰(zhàn)性。miRNeasy FFPE Kit 提供了特殊的裂解和孵育條件,對RNA解交聯(lián),并有效純化RNA,同時避免RNA的進一步降解。為了去除痕量的小DNA片段,以免妨礙下游分析(如實時定量RT-PCR),RNA經(jīng)過DNase 和DNase Booster Buffer 處理,此緩沖液優(yōu)化了DNase反應(yīng)。利用miRNeasy FFPE Kit 制備的總RNA隨后可用于miScript PCR System,以釋放寶貴的表達數(shù)據(jù)。

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